LabQ Taq DNA Polymerase

REACTION SETUP

1) Thaw all reaction components completely and mix gently to ensure even distribution off all components.
Prepare the reaction on ice in a sterile, nuclease free tube and mix gently after addition of the polymerase.
Collect all liquid at the bottom of the tube by a quick spin.

COMPONENT                                                                 VOLUME                              FINAL CONCENTRATION

10X PCR Buffer                                                                    5 µl                                                 1X
dNTP Mix (10 mM each)                                                    0.5 µl                                             0.1 mM each
Primer 1 (10 µM)                                                                  1 µl                                                 0.1 µM – 0.5 µM
Primer 2 (10 µM)                                                                 1 µl                                                  0.1 µM – 0.5 µM
LabQ Taq DNA Polymerase (5 U/µL)                             0.2 µl                                              1 U
template DNA                                                                       1 µl                                                 <1 µg
dH2O                                                                                     to 50 µl

2) Keep the reactions on ice until transfer to the thermocycler, then cycle according to these guidelines:

STEP                                               CYCLES                                  TEMPERATURE                              DURATION

Initial Denaturation                        1                                                    94°C                                               5 minutes
Amplification                               30-35                                                94°C                                              30 seconds
Tm – 5°C                                          30 seconds
72°C                                               1 minute / kb
Final Extension                                1                                                     72°C                                              5 minutes
Hold                                                    1                                                     4°C

3) Analyse the amplification reaction by gel electrophoresis using an acrylamide or agarose gel of appropriate
percentage.