LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal

LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal, 2000 Reaktionen

Allround-qPCR Mix für den SYBR®Green-basierten Nachweis
Optimiert für ein breites Anwendungsspektrum
Reduziert das Kontaminationsrisiko durch PCR-Produkte
Für alle PCR-Maschinen geeignet
2000 rxn á 20µl (4x5ml)

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LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal

1

Beinhaltet

HotStar-Funktion für maximale Kontrolle über den Reaktionsstart (z. B. in automatisierten Anwendungen).
dUTP/dTTP-Mischung zur Ermöglichung des UNG-Verdaus (Reduzierung des Kontaminationsrisikos durch PCR-Produkte).
Universelle ROX-Konzentration passend für alle PCR-Maschinen.
Zusätzliche Normalisierungsoption für Bio-Rad Cycler.
Verbesserte Leistung in Gegenwart von PCR-Inhibitoren.

2

Zusätzliche Materialien erforderlich

Nukleasefreie PCR-Gefäße oder -Platten und geeignete Verschlussoptionen.
Real-time PCRCycler.
PCR-Primer.
Vorlagen-DNA- und Kontroll-DNA-Standards.
Filter pipette tips.
Sterile, nukleasefreie, DNA-freie Röhrchen zur Herstellung des Reaktionsgemisches.

Reaktionsaufbau

Tauen Sie vor Beginn des Reaktionsaufbaus das LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal auf und mischen Sie es gründlich, aber vorsichtig, um eine gleichmäßige Verteilung der Komponenten zu gewährleisten.

Verdünnen Sie Ihre Standard-DNA und experimentelle Proben mit Nuklease-freiem Wasser auf die gewünschten Konzentrationen und geben Sie sie in die dafür vorgesehenen Vertiefungen in der Multi-Well-Platte.

Geben Sie für die Negativkontrolle nukleasefreies Wasser hinzu.

Halten Sie die Platte bis zur weiteren Verwendung auf Eis.

Component	Volume	Final Concentration
LabQ RealTime PCR Kit SYBR Universal	10µl	1X
Template DNA		< 10 ng for low complexity templates
	X µl	>1 for high complexity templates
		Max. 2µl of reverse transcription reaction
Forward primer (10µM)	0.4 µl	0.05 – 0.09 µM each
Reverse primer (10µM)	0.4 µl	0.05 – 0.9 µM each
Nuclease-free dH2O	To 20 µl

Empfohlenes qPCR-Protokoll

Set

Cycles

°C

Time

Initial Denaturation

1

95°C

5 minutes

Amplification

40

95°C

55-60°

72°C

10 seconds

15 seconds / 10 seconds

20 seconds

Fügen Sie bei Bedarf einen zusätzlichen Schmelzkurvenschritt hinzu. Eine Schmelzkurve wird empfohlen, um eine spezifische Amplifikation sicherzustellen und mögliche Primer-Oligomere nachzuweisen.